浅谈peprotech细胞因子使用

peprotech细胞因子在使用中应该注意一些什么呢？peprotech细胞因子操作过程是怎么样的呢？今天我们详细讲解下。

peprotech细胞因子中不含载体蛋白(Carrier Protein)或其他添加剂(如A、HAS或蔗糖等)，并且通常以最少量的盐来进行冻干处理，因此微量的细胞因子在冻干过程中会沉积于管内，形成很薄或不可见的蛋白层。所以我们建议在收到产品后，务必在开盖前先离心，使粘在管盖或管壁...浅谈peprotech细胞因子使用
peprotech细胞因子中不含载体蛋白(Carrier Protein)或其他添加剂(如A、HAS或蔗糖等)，并且通常以最少量的盐来进行冻干处理，因此微量的peprotech细胞因子在冻干过程中会沉积于管内，形成很薄或不可见的蛋白层。所以我们建议在收到产品后，务必在开盖前先离心，使粘在管盖或管壁上的蛋白聚集于管底(此时能否见到白色沉淀均属正常现象)。

1．离心：高速离心 (10, 000 rpm) 20-30 秒，或低速离心 (2, 000 rpm) 5 分钟。
        2．溶解(Recotitution)：用去离子水或其它缓冲液(根据说明书要求进行选择)溶解至说明书要求的浓度 (一般为 0.1-1.0 mg/mL，如10ug的产品，需用10uL-100uL的去离子水或缓冲液溶解)。溶解时不可振荡，避免因化学键的断裂造成蛋白失活，可加入适当的溶剂轻摇并静置一段时间，待细胞因子完全溶解后使用。溶剂的选择：
1)要求用去离子水溶解的产品，务必不可用盐溶液，避免过高的盐浓度造成蛋白不可逆的析出；
2) 要求用盐溶液溶解的产品，请依照说明书上的浓度，同样也是为了避免过高的盐浓度。
3．分装和贮存(Aliquot and Storage)：蛋白溶解后可根据自己的实验需要进一步稀释成工作液，稀释可用RPMI 1640、DMEM或等溶液，其中最好含有5-10%的FCS (小牛或胎牛血清)或0.5 %的A(牛血清白蛋白)来稳定蛋白。工作液在4℃可保存1周，如需长期保存，则需分装冻存于-20℃ (注意：不可冻存于-80℃)。分装时每管中工作液的体积最好是一次实验的用量，以实现每次实验用完一只工作液，避免反复冻融引起蛋白活性的降低